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產品名稱:Cell Counting Kit-8(CCK-8)細胞增殖和細胞毒性快速高靈敏度檢測試劑盒

產品型號:C0038

產品報價:

產品特點:Cell Counting Kit-8簡稱CCK-8試劑盒,是一種基于WST-8的廣泛應用于細胞增殖和細胞毒性的快速高靈敏度檢測試劑盒。100次 200次 500次 1000次 5000次現貨供應咨詢

C0038Cell Counting Kit-8(CCK-8)細胞增殖和細胞毒性快速高靈敏度檢測試劑盒的詳細資料:

Cell Counting Kit-8簡稱CCK-8試劑盒,是一種基于WST-8的廣泛應用于細胞增殖和細胞毒性的快速高靈敏度檢測試劑盒。
WST-8是一種類似于MTT的化合物,在電子耦合試劑存在的情況下,可以被線粒體內的一些脫氫酶還原生成橙黃色的formazan(參考圖1)。細胞增殖越多越快,則顏色越深;細胞毒性越大,則顏色越淺。對于同樣的細胞,顏色的深淺和細胞數目呈線性關系。

圖1. WST-8檢測原理圖 (EC=electron coupling reagent,即電子耦合試劑)
WST-8是MTT的一種升級替代產品,和MTT或其它MTT類似產品如XTT、MTS等相比有明顯的優點。首先,MTT被線粒體內的一些脫氫酶還原生成的formazan不是水溶性的,需要有特定的溶解液來溶解;而WST-8和XTT、MTS產生的formazan都是水溶性的,可以省去后續的溶解步驟。其次,WST-8產生的formazan比XTT和MTS產生的formazan更易溶解。再次,WST-8比XTT和MTS更加穩定,使實驗結果更加穩定。另外,WST-8和MTT、XTT等相比線性范圍更寬,靈敏度更高。
WST-8和WST-1相比,檢測靈敏度更高,更易溶解,并且更加穩定。
本試劑盒可以用于細胞因子等誘導的細胞增殖檢測,也可以用于抗癌藥物等對細胞有毒試劑誘導的細胞毒性檢測,或一些藥物誘導的細胞生長抑制檢測。
本試劑盒檢測非常便捷。試劑盒僅一管已經配制好的含有WST-8的CCK-8溶液,無須再進行任何配制等操作。無須使用同位素,所有的檢測步驟僅在同一塊96孔板內完成。不必洗滌細胞,不必收集細胞,也不必采用額外的步驟去溶解formazan。可以用于大批量樣品的檢測。
酚紅和血清對本試劑盒的測定無明顯影響。
WST-8對細胞無明顯毒性。加入WST-8顯色后,可以在不同時間反復用酶標儀讀板,使檢測時間更加靈活,便于找到zui佳測定時間。
本試劑盒可以測定500個樣品。
包裝清單:

產品編號

產品名稱

包裝

C0038

CCK-8溶液

5ml

說明書

1份

保存條件:
4℃避光保存一年有效,-20℃避光保存兩年有效。
注意事項:
由于使用96孔板進行檢測,如果細胞培養時間較長,一定要注意蒸發的問題。一方面,由于96孔板周圍一圈zui容易蒸發,可以采取棄用周圍一圈的辦法,改加PBS,水或培養液;另一方面,可以把96孔板置于靠近培養箱內水源的地方,以緩解蒸發。
本試劑盒的檢測依賴于脫氫酶催化的反應,如果待檢測體系中存在較多的還原劑,例如一些抗氧化劑會干擾檢測,需設法去除。
用酶標儀檢測前需確保每個孔內沒有氣泡,否則會干擾測定。
為了您的安全和健康,請穿實驗服并戴一次性手套操作。

使用說明:
1. 通常細胞增殖實驗每孔加入100微升2000個細胞,細胞毒性實驗每孔加入100微升5000個細胞(具體每
孔所用的細胞的數目,需根據細胞的大小,細胞增殖速度的快慢等因素決定)。按照實驗需要,進行培養
并給予0-10微升特定的藥物刺激。
2. 每孔加入10微升CCK-8溶液。如果起始的培養體積為200微升,則需加入20微升CCK-8溶液,其它情況以
此類推。可以用加了相應量細胞培養液和CCK-8溶液但沒有加入細胞的孔作為空白對照。如果擔心所使用
的藥物會干擾檢測,需設置加了相應量細胞培養液、藥物和CCK-8溶液但沒有加入細胞的孔作為空白對
照。
3. 在細胞培養箱內繼續孵育0.5-4小時,對于大多數情況孵育1小時就可以了。時間的長短根據細胞的類
型和細胞的密度等實驗情況而定,初次實驗時可以在0.5、1、2和4小時后分別用酶標儀檢測,然后選取
吸光度范圍比較適宜的一個時間點用于后續實驗。
4. 在450nm測定吸光度。如無450nm濾光片,可以使用420-480nm的濾光片。可以使用大于600nm的波長,例
如650nm,作為參考波長進行雙波長測定。

 

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