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產品名稱:原裝GIBCO透析型胎牛血清FBS正品

產品型號:30067-334

產品報價:

產品特點:原裝GIBCO透析型胎牛血清FBS正品
貨號:30067-334
規格:500ml
品牌:北美源
庫存:少量現貨

30067-334原裝GIBCO透析型胎牛血清FBS正品的詳細資料:

原裝GIBCO透析型胎牛血清FBS正品

處理:全部血清:收集的血液均在冷藏條件下處理。血清和血分離后立即將血清合并并冷凍。只有符合我們的檢測標準的血清才被接受作進一步處理。

熱滅活血清:熱滅活是在56℃水浴中嚴格控溫30分鐘。透析血清:用10,000截留分子量的透析膜在0.15M的NaCl中進行透析,直到葡萄糖水平低于5mg/dl(用鄰甲苯胺測試法檢驗)。γ射線照射血清:可按客戶要求對血清進行γ射線照射。通過γ射線照射以滅活各種動物血清(包括胎牛血清、新生牛血清、豬血清和馬血清)中的病毒和支原體的方法已經得到證實。研究證實照射劑量在30-45kGy為宜。血清在此照射后物理化學特性和細胞培養表現沒有變化。裝瓶:粗血清須通過一系列的過濾才成為成品。zui后的過濾步驟包括使用0.2um和0.1um的無菌過濾。胎牛血清須通過三次0.1um過濾,其他血清須通過0.2um過濾。zui終產品的質量控制:我們采取以下方法對每一批次的產品選取一定數量的樣品進行質量控制分析:

化學檢測:使用低溫凝固點的方法檢測滲透壓,以保證符合產品規范。我們每天使用國家標準的技術研究所標定的標準溶液對我們的滲透壓檢測儀器進行校準。同樣每天使用國家標準技術研究所標定的標準溶液對pH計進行校準。

使用電泳圖譜鑒定血清的整體性質。樣品被轉移到xiao酸纖維素基質中,并在緩沖體系內遷移。條帶經染色、清潔、干燥后用密度儀進行掃描,以檢測白蛋白和球蛋白組分的相對濃度。為證實是否在適當的條件下進行采血和處理,使用修飾的Fleming方法對血紅蛋白進行分光光度檢測。

隨著動物年齡的增加,血清總蛋白含量也相應地提高。使用自動化的Biuret方法進行總血清蛋白的檢測,以確認動物年齡并驗證符合產品規范。使用色度計在不同波長下檢測樣品和Biuret試劑混合波的吸光度。自動計算結果后,與標準曲線比較,即可得到蛋白值(克/公升)。

穩定性檢測程序:在每一個標記為體外診斷的產品上顯示的效期表明了這個產品具有多長時間的效能。我們的穩定性程序確定和證明了產品效期。我們定期監測批量產品,確定產品在推薦貯存條件下具有可接受效果的時間長度。

微生物學檢測:所有血清使用Barile&Kern的大體積方法檢測支原體。在推薦方法的檢測范圍內檢測結果是準確的。樣品至少應該在肉湯中合并培養3個星期,同時要在瓊脂平板上進行不少于4次傳代培養。在有氧和厭氧(95%氮,5%CO2)條件下,平板在36±2℃下孵育。在檢測過程中,每周對瓊脂平板進行一次微生物生長情況檢驗。使用Dienes染色法對懷疑被污染的瓊脂平板進行支原體菌落的檢測。然后,對平板進行再次鏡檢。對孵育肉湯瓶要定期進行濁度和pH值變動的檢測。在推薦方法檢測范圍內,所有血清也要使用Hoechst熒光DNA染色法進行不可在肉湯中培養的支原體(包括M.hyorhinis屬)檢測。

病毒檢測:已知無外來物質的細胞培養基須經過在包含15%測試血清的生長培養基中進行為期21天的三次傳代培養。使用對照培養基和已知對外來物質為陰性的血清平行地維持陰性對照培養。整個期間,檢測所有的培養情況,以便發現是否存在病毒誘發的細胞形態改變或致細胞病變效應。在14至21天的培養期間,對含有檢測血清的平行培養瓶按下面標準病毒檢測方法進行評估。

將其中一瓶檢測細胞用胰蛋白酶消化,然后把細胞分別加入到總面積為6cm 2 的六室載玻片上。同時準備陰性對照載玻片。在檢測培養的單室載玻片上加入牛病毒性腹瀉病毒(BVDV)、牛細小病毒、牛腺病毒、狂犬病毒和呼腸病毒的染色劑,作為單個的陽性對照。再經過7天培養(總共21天),利用熒光抗體技術檢測病毒。

通過對檢測培養進行蘇木精伊紅染色,觀察致細胞突變效應(CPE)或其他病毒誘導效應。檢測細胞是否存在CPE效應、內含物、多核體或其他異常效應。

內毒素檢測:我們用阿米巴變形細胞溶解物(LAL)凝膠法來檢測胎牛血清的內毒素含量。

效能檢測:
對每一批次的胎牛血清,我們都進行下述培養效能檢測。選擇血清zui重要的標準是其支持特殊細胞的生長能力。因此,除了保證血清通過嚴格的品質控制,我們也同時在實驗室條件下對血清的三個重要的培養效能進行檢測:克隆效率、貼壁效果和二倍體成纖維細胞生長促進。

克隆效率分析:克隆效率實驗分析每一批胎牛血清促進小鼠骨髓瘤細胞及其衍生的雜交瘤細胞的克隆和生長能力。下列產品
經驗證可用于該實驗:
Sp2/0-Ag14(ATCC #CRL 1581)
P3x63-Ag8.653(ATCC #CRL 1580)

每一批胎牛血清都要分別在復制微量滴定平板上加入兩種血清濃度和兩種細胞接種量(10%血清和1cell/孔,4%血清和5cells/孔)的情況下進行分析。克隆分析結果除以已確定的參照血清值得以歸一化。在許多日常雜交選擇程序中具有代表性的是高濃度的血清,而低濃度血清在設計血清批次細微差異放大檢測中有更為嚴格的測試。嚴格的1cell/孔測試是模擬單一雜交選擇的實驗室條件。為每一批次胎牛血清提供的分析證明報告中的克隆效率值為兩次測試條件下的平均值。

克隆分析法:克隆分析法是在復式96孔板中加入兩種胎牛血清濃度(10%v/v)和(4%v/v)和兩種接種量的情況下進行的。每一次化驗中,同時測量前期已驗證合格的一批胎牛血清,并將此測量值作為內部參考標準。

    原裝GIBCO透析型胎牛血清FBS正品

     

    細胞生長分析法。

    1.使用含10%檢測或參照熱滅活胎牛血清的已驗證的Grace昆明培養基配制完全檢測培養基。

    2.將儲備Sf9細胞加入50毫升離心管中,在50Xg下離心5分鐘。然后將每支試管的沉淀物重新用含10%的檢測或參照熱滅活胎牛血清完全培養基配制成懸浮液。

    3.反試管顛倒幾次,然后每支試管倒出1毫升樣品。用臺盼藍染色排除進行活細胞計數。

    4.如果活性≥80%,把試管再顛倒幾次并取出0.25毫升樣品。然后用Coulter計數器進行細胞計數。

    5.將細胞加入Erlenmeyer瓶中,使其zui終細胞濃度為2.75X10 5 cells/ml。孵育后,再一次進行細胞計數,以保證細胞密度為2.5X10 5 至3.0X10 5 cells/ml。

    6.將培養瓶放到搖床上,在27℃±1℃、80-90rpm條件下孵育96小時。

    7.從每一培養瓶中分別取出0.25毫升樣品,用Coulter計數器進行計數。同時取出一定量的樣品進行細胞活性檢測。

    8.將檢測細胞密度與參照細胞密度相比即可得到相對細胞密度(RCN)。

    噬菌體檢測:我們利用溶菌斑分析法來檢測是否存在噬菌體。從每一批血清中取具代表性的樣品加入胰蛋白酶磷酸瓊脂中,并在其加入含有噬菌體敏感的大腸桿菌懸浮液(C-3000或K-12)。然后,混合物會在胰蛋白酶磷酸瓊脂平板上分層,在36±2℃環境下孵育約24小時后,觀察平板上溶菌斑的形態。

     

    【簡單介紹】

    gibco30067-334透析型胎牛血清新西蘭500ml

    很多血清客戶,會發現進口血清有沉淀,從而懷疑血清的質量問題,這是沒有根據的。
    血清中的沉淀是由纖維蛋白的凝聚產生,對血清質量沒有任何影響,沉淀的產生原因很多,和廠家的加工生產方式密切相關。

    【詳細說明】

    gibco    30067-334    透析型胎牛血清    新西蘭        500ml

    二、主要技術指標
    目前國內血清的質量標準是2005版的《中華人民共和國藥典》,主要指標有以下幾點:

    1、內毒素
    標準為不高于5EU/ml。內毒素是細菌破碎后細胞壁的成分,因此內毒素含量的高低可表現出采血到生產一系列過程中的無菌操作情況。目前,國產血清基本都能達到這一要求,很多進口胎牛血清內毒素含量反而更高,如Gibco 26140,只要求不高于50EU/ml,高出我國標準10倍,即使是16000,也要10EU/ml,血清質量也未見影響。可見,內毒素含量偏高不影響質量,除非含量極高,預示著已經污染。

    2、總蛋白含量
    胎牛血清一般范圍是30-40mg/ml,數值偏高,說明采血的牛齡偏大,不是胎牛,數值偏低,表明血清可能摻水了。

    3、血紅蛋白
    標準為不高于20mg/dl,顏色越紅,數值越高,反之,數值越低。

    4、pH
    國產血清,大多高于7.5,進口胎牛血清,大多低于7.5,具體原因未知,可能和牛齡有關,這也能用來初步鑒別血清的來源。

    5、微生物
    包括細菌、霉菌、支原體、噬菌體、各類病原性病毒等。隨著國內血清廠家生產條件的改善提高,細菌、霉菌等“大型"微生物幾乎能100%控制,支原體經過0.1um過濾,大多也能清除。大腸桿菌噬菌體的污染還是比較嚴重的,主要是生產環境過程中帶入,又無法過濾,很難徹底清除,但對血清質量影響不大。病原性病毒,特別是BVDV,在國產血清中幾乎90%以上都存在,這類微生物是影響國產血清質量的重要因素之一,而進口胎牛血清中基本都控制的很好。

    6、免疫球蛋白
    國產血清的只是定性檢測,結果也很不準確,進口胎牛血清大多定量檢測。免疫球蛋白的數值能完全體現出采血的時的牛齡情況,國產血清,基本都是新生牛的,血清中容易產生IgM,IgG的含量也偏高,進口胎牛血清,不含IgM,IgG的含量也較低。

       

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